Đầu thế kỷ 21, cậu bé Peter Parker sống với bác May và bác Ben sau một tai nạn máy bay làm cha mẹ cậu qua đời. Peter là một học sinh trung học sống hơi khép mình, thông minh và say mê nghiên cứu khoa học. Cậu chỉ có hai người bạn thân duy nhất là Mary Jane xinh đẹp và Harry Osborn, con trai của nhà công nghiệp giàu có Norman Osborn. Vô tình bị cắn bởi một con nhện biến đổi gen, Peter phát hiện ra mình có những khả năng siêu phàm của loài nhện. Cái chết bất ngờ của bác Ben do một tên cướp gây ra làm cho Peter nhận ra rằng: "Với sức mạnh to lớn phải đi kèm với trách nhiệm to lớn". Cậu đã khoác lên mình bộ trang phục huyền thoại của Spider-Man và bắt đầu con đường hành hiệp
